研究概述与科学背景癌症免疫治疗领域近年来取得显著进展，其中嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法在血液肿瘤治疗中展现出巨大潜力。然而，自体CAR-T细胞疗法面临制造周期长、成本高以及患者选择限制等挑战，尤其对于疾病进展或既往治疗导致T细胞功能不全的患者而言，适用性受限。同种异体“现货”细胞产品（如同种异体CAR自然杀伤T细胞，AlloCAR-NKT）有望克服这些局限。自然杀伤T（NKT）细胞是一类独特的αβT细胞亚群，表达 invariant TCR（如人源TRAV10-TRAJ18）并共表达NK标记，具有 potent 肿瘤杀伤活性、肿瘤浸润能力以及桥接先天和适应性免疫应答的特性。此外，NKT细胞通过识别非多态性MHC样分子CD1d，不预期诱发移植物抗宿主病（GvHD），因而成为开发同种异体细胞治疗的理想候选。以往研究报道了通过三维培养和异种饲养细胞分化造血干细胞和祖细胞（HSPCs）生成NKT细胞的方法，但该策略临床转化受限。本文解析的文献（Nature Biotechnology, 2025, 43:329-344）提出了一种临床导向的培养方法，无需三维培养或异种饲养细胞，实现了高产量和高纯度的IL-15增强型AlloCAR-NKT细胞的生成。该方法靶向多种癌症抗原，并在多发性骨髓瘤模型中验证了其抗肿瘤功效、扩展性和持久性。此外，AlloCAR-NKT细胞通过CAR、TCR和NK受体的三重靶向机制，选择性耗竭免疫抑制性肿瘤微环境细胞，并表现出稳定的低免疫原性表型，未诱发可检测的GvHD或细胞因子释放综合征（CRS）。这些特性支持其临床转化潜力。同种异体CAR-NKT细胞的体外生成与表征研究采用五阶段、为期六周的培养流程，从人脐带血来源的CD34+ HSPCs生成AlloCAR-NKT细胞。阶段0涉及冻融CD34+ HSPCs的慢病毒转导，载体共同递送人iNKT TCR、特定CAR（如靶向BCMA、CD19、GD2、GPC3或EGFRvIII）及附加基因（如IL-15）。转导后，细胞在常规X-VIVO 15基础培养基中培养48小时。阶段1为HSPC扩展（2周），使用StemSpan SFEM II培养基补充淋巴祖细胞扩展添加剂；阶段2为NKT分化（1周），采用淋巴祖细胞成熟添加剂；阶段3为NKT深度分化（1周），加入CD3/CD28/CD2 T细胞激活剂和IL-15；阶段4为NKT扩展（2周），可通过无饲养细胞策略或人源饲养细胞（如αGC负载的PBMCs或K562基础人工抗原呈递细胞）实现。整个流程在无饲养细胞、无血清条件下进行，确保临床兼容性。细胞分化遵循典型T细胞谱系承诺和NKT发育路径，从CD4-CD8双阴性经CD4+CD8+双阳性最终分化为CD8+单阳性或双阴性阶段，缺乏内源性人NKT细胞中常见的CD4+单阳性群体。最终产品中，CD8 AlloCAR-NKT细胞以CD8α/α形式为主（约80%），类似于内源性NKT细胞。CAR或CAR/IL-15基因的引入未干扰分化，所有细胞均共表达转基因iNKT TCR和CAR。产量方面，从输入CD34+ HSPCs到输出成熟AlloCAR-NKT细胞实现了超过10^6倍的扩展，常规培养中可从10^4个HSPCs生成约10^10个成熟细胞。该流程在15个脐带血供体和多种 cargo 基因中均表现稳健，产品纯度高，内源性αβTCR未检测到，可能源于转基因TCR过表达诱导的等位基因排斥。生成过程的表征通过流式细胞术和单细胞TCR测序验证，显示均匀的iNKT TCR表达。例如，图1e和1f通过流式监测生成过程，证实iNKT TCR和CAR的共表达。细胞表型与功能特性分析AlloCAR-NKT细胞（以IL-15增强的Allo/15BCAR-NKT细胞为重点）的表型与内源性人PBMC来源的常规αβT细胞、NK细胞和NKT细胞（分别记为PBMC-Tc、PBMC-NK和PBMC-NKT）进行比较。批量RNA测序分析显示，Allo/15BCAR-NKT细胞基因谱与PBMC-NKT细胞高度相似，其次为PBMC-Tc细胞，而与PBMC-NK细胞差异较大。为验证iNKT TCR功能，细胞经激动剂糖脂抗原αGC刺激后，表现出强劲增殖和Th1细胞因子（如IFNγ和TNFα）的高分泌，而Th17细胞因子（如IL-4和IL-17a）水平较低，表明其Th1倾向功能，与其CD8单阳性/双阴性表型一致。流式分析揭示Allo/15BCAR-NKT细胞表达高水平NK受体（如CD161）和中央记忆标记（如CD62L、CD134和LEF1），并产生高水平的效应细胞因子（如IFNγ、IL-2和TNFα）和细胞毒性分子（如颗粒酶B和穿孔素）。与常规BCAR-T细胞相比，Allo/15BCAR-NKT细胞的细胞毒性功能更强，这与其多靶向机制相关。例如，图1j显示Allo/15BCAR-NKT细胞在表面标记和细胞内因子表达上显著优于对照细胞。功能上，AlloCAR-NKT细胞通过CAR识别CAR抗原、TCR识别CD1d以及NKR识别NK配体，实现多重靶向。对于CD1d+肿瘤（如多发性骨髓瘤、急性髓系白血病等），可采用三重靶向；对于CD1d-肿瘤，仍可通过CAR/NKR双靶向发挥作用。这种机制在体外杀伤实验中得到验证，其中Allo/15BCAR-NKT细胞对原代多发性骨髓瘤细胞的杀伤效果优于常规BCAR-T细胞，即使无CAR工程，AlloNKT细胞也显示一定肿瘤杀伤能力，表明其CAR非依赖性潜力。体外抗肿瘤功效及作用机制研究通过一系列体外实验评估AlloCAR-NKT细胞的抗肿瘤功效。以多发性骨髓瘤为例，收集原代患者骨髓样本，检测到MM细胞普遍共表达BCMA、CD1d和NK配体。在体外肿瘤细胞杀伤实验中，Allo/15BCAR-NKT细胞在消除原代MM细胞方面优于常规BCAR-T细胞。即使无CAR工程，AlloNKT细胞也显示可观杀伤能力，略低于Allo/15BCAR-NKT细胞，表明其CAR非依赖性潜力。为验证CAR/TCR/NKR三重靶向机制，研究使用人MM.1S衍生细胞系作为靶点（包括BCMA+CD1d+、BCMA+CD1d-和BCMA-CD1d-细胞）以及多种治疗细胞（如Allo/15BCAR-NKT细胞和对照细胞）。结果发现，BCAR-T细胞仅依赖BCAR-BCMA识别发挥细胞毒性，而Allo/15BCAR-NKT细胞对BCMA+和BCMA-肿瘤细胞均显示细胞毒性，表明其对BCAR-BCMA识别的依赖性较低。此外，在CD1d存在下，杀伤效果增强，证实TCR介导的靶向；通过NKG2D和DNAM-1等NKR识别，可杀伤BCMA-CD1d-肿瘤细胞，验证NKR介导机制。扫描电镜图像直观显示Allo/15BCAR-NKT细胞对MM.1S肿瘤细胞的直接攻击。与多靶向机制和强细胞毒性功能一致，Allo/15BCAR-NKT细胞在杀伤原代样本和细胞系时均优于BCAR-T细胞，这与激活标记（如CD69）上调和细胞毒性分子产生相关。图2d至2n详细展示了这些实验结果，包括杀伤数据和分子表达量化。体内抗肿瘤功效与药代动力学研究为评估体内功效和药代动力学-药效学（PK-PD），研究使用人MM异种移植NSG小鼠模型进行镜像实验。在功效实验中，MM肿瘤细胞标记萤火虫荧光素酶和增强型绿色荧光蛋白（FG）双报告基因；在PK-PD实验中，治疗细胞标记FG报告基因，以实时动态观察肿瘤细胞和治疗细胞的生物分布。在高肿瘤负荷条件下，单次给药Allo/15BCAR-NKT细胞在大多数实验鼠（10只中9只）中实现肿瘤消除，且所有鼠长期存活（>80天）。相比之下，BCAR-T细胞和未增强的AlloBCAR-NKT细胞仅部分抑制肿瘤生长，生存改善有限，且部分鼠因肿瘤生长和GvHD死亡。PK-PD研究显示，Allo/15BCAR-NKT/FG细胞扩展200倍以上，峰值出现在第2周，随后逐渐下降并长期持久（>80天），且表现出强肿瘤归巢能力，优先富集于骨髓等主要肿瘤部位。未增强的AlloBCAR-NKT/FG细胞扩展适度（约5倍），峰值在第1周，随后迅速下降，持久性约10天。常规BCAR-T/FG细胞初期扩展与AlloBCAR-NKT细胞相似，但40天后因GvHD诱发快速扩展和器官浸润，导致鼠死亡。这些结果通过生物发光成像（BLI）量化，如图3c至3k所示，其中图3h和3i显示治疗细胞动态，图3j和3k展示生物分布。体内基因表达谱分析通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析体内抗肿瘤性能的基因组和分子调控。在MM异种移植模型中，收集三种治疗细胞（Allo/15BCAR-NKT、AlloBCAR-NKT和BCAR-T细胞）在三个时间点（输注前第0天、体内第28天和体外再刺激第35天）的样本进行scRNA-seq。统一流形近似与投影（UMAP）分析识别出五个主要细胞簇：增殖细胞（簇1）、效应/记忆细胞（簇2）、早期耗竭细胞（簇3）、终末耗竭细胞（簇4）和静息细胞（簇5）。比较第0天输注前和第28天体内样本，所有治疗细胞均显示基因谱大幅变化，表明体内基因组特征无法仅通过输注前产品捕获。第35天再刺激的Allo/15BCAR-NKT细胞杀伤能力与输注前相似，而BCAR-T细胞再刺激后杀伤能力下降，与效应/记忆细胞簇保存更好一致。聚焦第28天非增殖细胞群，Allo/15BCAR-NKT细胞含更多效应/记忆细胞，更少早期和终末耗竭细胞。RNA速率分析显示Allo/15BCAR-NKT细胞积累于效应/记忆阶段，而BCAR-T细胞滞留于早期耗竭阶段。通路和基因特征分析表明，与BCAR-T细胞相比，Allo/15BCAR-NKT细胞显示增强的效应/记忆特征和减弱的耗竭特征，这与其 superior 体内功效相关，可能归因于IL-15表达。此外，AlloCAR-NKT细胞在体内表现出更少的T细胞特征和更高的NK细胞特征，反映于NKR表达和NKR介导的杀伤，且不与耗竭迹象相关。图4a至4i详细展示了这些发现，包括簇组成、RNA速率和通路富集。肿瘤免疫逃逸的拮抗机制通过scRNA-seq分析同一体内实验中的MM肿瘤细胞，重点研究肿瘤免疫逃逸，特别是CAR抗原丢失。发现BCAR-T细胞处理的肿瘤中BCMA抗原表达减少，而Allo/15BCAR-NKT细胞处理的肿瘤无BCMA丢失，可能源于其多靶向机制。图5a至5c通过UMAP和Violin图显示TNFRSF17（编码BCMA）基因表达分布，证实这一现象。此外，AlloCAR-NKT细胞靶向免疫抑制性肿瘤微环境（TME）。肿瘤相关巨噬细胞和髓源性抑制细胞（MDSCs）作为TME主要组分，表达CD1d。在原代MM患者样本共培养实验中，Allo/15BCAR-NKT细胞有效选择性耗竭这些细胞，而保留其他免疫细胞（如粒细胞、T细胞、B细胞等）。在体内模型中，Allo/15BCAR-NKT细胞处理改变TME组成，选择性耗竭TME特征细胞（如M2样巨噬细胞、CRS相关巨噬细胞和MDSCs），而保留造血干细胞等。图5d至5o展示了TME靶向数据和CD1d表达。安全性评估与低免疫原性特性安全性方面，CRS相关巨噬细胞在MM植入小鼠骨髓中被识别，Allo/15BCAR-NKT细胞处理有效耗竭该群体并降低血清CRS生物标记（如IL-6和SAA-3）。GvHD风险评估通过体外混合淋巴细胞反应（MLR）和体内模型进行。在MLR中，Allo/15BCAR-NKT细胞刺激后仅产生微量IFNγ，而BCAR-T细胞剧烈产生IFNγ。体内模型中，BCAR-T细胞诱发严重GvHD和器官浸润，而Allo/15BCAR-NKT细胞实现无GvHD长期存活。低免疫原性方面，Allo/15BCAR-NKT细胞在体外和体内均表达低水平表面HLA-I、HLA-II和NK配体（如ULBP-1），RNA-seq显示相关基因持续低表达，表明转录水平调控的稳定低免疫原性表型。表观遗传调控（如启动子区域高甲基化）和信号网络（如脱敏的IFNγ-JAK-STAT1通路）可能贡献这一特性。过表达组成型活性STAT1部分逆转低免疫原性，证实机制。图6a至6q总结了这些结果，包括MLR数据、组织学分析和分子实验。与PBMC来源CAR-NKT细胞的比较侧向比较HSPC来源的Allo/15BCAR-NKT细胞与PBMC来源的IL-15增强BCAR-NKT细胞（PBMC15CAR-NKT）。流式分析显示二者在效应细胞因子和细胞毒性分子产生方面高度相似，但Allo/15BCAR-NKT细胞表达更高水平NKR（如DNAM-1、NKp44和NKp30），表明增强的NK特征。在体外和体内抗肿瘤功效上，二者对BCMA+MM细胞杀伤相似，但Allo/15BCAR-NKT细胞对BCMA-肿瘤细胞（如黑色素瘤A375和白血病K562）杀伤更强，与其NKR表达一致。scRNA-seq整合分析显示，两种CAR-NKT细胞均表达混合T/NK特征基因，过继转移后耗竭和溶细胞功能基因上调，但Allo/15BCAR-NKT细胞NK基因表达整体更高。图7a至7p详细展示比较数据，包括表型、杀伤实验和基因表达Violin图。

近期，有学者在《Ophthalmic Res》期刊发表了一篇关于干细胞治疗创伤性视神经病变的I期临床试验。文献显示，10例患者接受治疗后1个月，视力较治疗前（0.00151vs ‌0.0162）平均提升973%，是治疗前的10.7倍，并在6个月随访期内保持稳定！ 视网膜神经节细胞（RGC）是负责将视觉信号从眼睛传递到大脑的关键神经元，其轴突构成视神经。RGC对视力至关重要，若RGC受损或死亡，即使其它视觉系统正常，仍会导致视力丧失。 TON是一种直接或间接损伤，会导致严重的视觉功能损害。在直接损伤中，应力直接作用于视神经，导致视神经骨折撕裂，预后通常较差；在间接损伤中，应力通过软组织和骨骼传递，常导致缺血、炎症、氧化损伤，最终导致神经节细胞凋亡。 目前，保守治疗、大剂量激素治疗、视神经管减压术及联合疗法作为治疗TON的主要手段，虽能缓解症状并解除局部阻塞压迫，但无法从根本上改善受损微环境导致的胶质瘢痕形成及RGC凋亡问题，迫切需要一种新的TON治疗策略。 有研究表明，将人源MSCs通过玻璃体内注射到急性视神经损伤大鼠的玻璃体腔中，可减少早期RGC细胞的凋亡和炎症。此外，还发现MSCs移植可通过调节损伤部位促炎因子向抗炎因子转化，显著改善神经损伤预后。 基于这些研究，中国陆军军医大学大坪医院眼科研究团队开展了一项人脐带来源MSCs治疗TON I期临床试验。旨在探讨MSCs移植治疗TON患者的安全性和可行性。据了解，这是文献中首个探讨MSCs作为TON治疗方案的研究。 患者筛选： 共纳入20例TON患者，平均年龄28.15±15.07岁，2例女性，18例男性。他们被随机分为两组，分别接受视神经管减压联合MSCs局部植入治疗（第1组）或单纯视神经管减压术（第2组）。 方 法： 在全麻条件下，以肾上腺素棉片收缩鼻甲，切除上鼻甲暴露蝶窦前壁，开放后组筛窦，准确定位后，磨除1/2管径的视神经管内壁骨质，纵行切开视神经鞘膜。1组覆盖MSCs-明胶海绵支架（每个支架1*10⁶个细胞），2组用无菌明胶海绵支架（图1）。视力改善情况： 与基线相比，两组患者术后1周视力均显著改善（图3）。第1组患者术后1周视力显著改善，并在1个月时（logMAR视力（1.79）转换成Snellen视力（‌0.0162））持续显著改善，1个月后达到稳定期。第2组患者术后1周视力有所改善，之后开始趋于稳定（图3）。组间比较显示，术后第1组视力改善显著优于第2组（表2）。 色觉改善情况： 与基线相比，术后3~6个月，第1组患者的色觉有所改善，而第2组在随访期间色觉未见显著改善，6个月后，两组均无统计学差异（表2）。 视觉传入改善情况： 与基线相比，术后1~6个月，第1组RAPD（相对传入性瞳孔障碍）显著改善，第2组在各个时间点均存在显著差异（表2），6个月后，两组均无统计学显著性差异。 视觉通路改善情况： 在第1组中，有3例患者（30%）由于视力较差无法记录FVEP（闪光视觉诱发电位），而在第2组中有4例患者（40%）无法记录FVEP。与基线相比，第1组P2波的振幅在第6个月显著增加（表3）。 安全性分析： 试验中未观察到与MSCs局部植入相关严重不良事件，在第1组中，1例患者出现脑脊液漏，分析显示，与手术相关，与MSCs植入无关。 总 结： 这项I期临床试验结果证实，单次MSCs移植对于TON患者耐受性良好且安全。在临床研究中，‌logMAR提升≥0.3‌就被认为是‌有临床意义的改善‌，该试验仅1个月就提升了 ‌1.03‌，是非常显著的改善，并且之后的随访期内一直保持着这种改善！ 该项I期试验同样存在一些局限性，由于仅有20例患者且随访时间仅为6个月，只能得出关于短期安全性的结论，而无法得出关于MSCs治疗TON长期疗效结论。 另外其它临床结果也未出现显著差异，被认为是样本量小和统计效能不足所致，而非证实缺乏治疗效果，所以在后续研究中，应纳入更多患者和增加随访时间和治疗次数，以期得出更可靠结论。参考资料：【1】Jia Li et al.Treatment of Optic Canal Decompression Combined with Umbilical Cord Mesenchymal Stem (Stromal) Cells for Indirect Traumatic Optic Neuropathy: A Phase 1 Clinical Trial.Ophthalmic Res 2021;64:398–404.DOI: 10.1159/000512469.注：本文参考资料和图片均为外网开放获取，无侵权行为！

多角体启动子驱动的超表达与蛋白复合物组装机制 在重组蛋白研究中，杆状病毒-昆虫细胞表达系统（Baculovirus-Insect Cell Expression, BEVS）是一套以病毒感染周期为核心驱动力的真核表达平台。与依赖质粒转染的系统不同，BEVS 通过基因工程化的杆状病毒，将外源基因高效递送至昆虫细胞核内，并在病毒复制的极晚期阶段，重定向宿主的转录与翻译资源，实现高水平蛋白表达。从结构生物学角度看，BEVS 尤其适用于高分子量蛋白、多亚基复合物及病毒样颗粒的获取，其技术核心在于病毒极晚期启动子的超强转录能力与昆虫细胞内源性折叠和修饰体系的协同作用。一、病毒生活史与多角体启动子的分子逻辑BEVS 的技术基础源于苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus, AcMNPV）。该病毒具有清晰分化的双相感染周期：感染早期以出芽病毒（Budded Virus, BV）形式在细胞间扩散；感染极晚期则进入包涵体形成阶段，用于保护病毒颗粒在宿主外环境中的稳定存在。包涵体的主要组成成分是多角体蛋白（Polyhedrin）。在野生型病毒中，多角体基因（polh）受极晚期多角体启动子驱动，其转录产物可占据细胞总 mRNA 的极高比例。BEVS 正是利用这一特性，通过同源重组或转座策略，用目标基因替代 polh 编码序列。在细胞培养条件下，多角体蛋白对病毒复制并非必需，因此该替换不会显著影响病毒扩增，却能在细胞裂解前的最后阶段，将宿主的转录和翻译资源集中用于目标蛋白合成，实现“超表达”。二、Bacmid 穿梭载体与 Tn7 转座机制在现代 BEVS 构建中，Bac-to-Bac 系统已成为主流技术路线，其核心在于对原核 Tn7 转座机制的巧妙利用。该体系以 E. coli DH10Bac 菌株为操作平台，菌株内含一个大型穿梭载体 Bacmid，即杆状病毒的完整基因组。Bacmid 中预置 lacZ 基因及 attTn7 转座位点。当携带目标基因并含有 Tn7L/R 序列的供体质粒导入菌株后，在辅助质粒编码的转座酶作用下，目标基因被特异性插入 Bacmid 的 lacZ 区域，从而导致 lacZ 失活。通过蓝白斑筛选即可快速鉴定成功重组体。纯化获得的高分子量重组 Bacmid DNA 随后用于转染昆虫细胞，启动病毒复制周期。三、昆虫宿主细胞的代谢特性：Sf9 与 High Five在 BEVS 中，宿主细胞的选择直接影响蛋白表达水平与质量。最常用的细胞系来源于两种鳞翅目昆虫：草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）和粉纹夜蛾（Trichoplusia ni）。Sf9 细胞是 Sf21 的克隆株，具有生长稳定、对病毒感染高度适配的特性，常用于病毒扩增与滴度测定。其糖基化能力相对基础，主要产生高甘露糖或简化型糖链。相比之下，High Five 细胞在蛋白合成与分泌能力方面表现更为突出，其单位细胞蛋白产量通常显著高于 Sf9，并且在无血清悬浮培养条件下蛋白酶背景较低，使其更适合作为蛋白生产宿主。四、翻译后修饰与昆虫细胞糖基化图谱作为真核系统，昆虫细胞具备完整的内质网与高尔基体结构，能够完成二硫键形成、磷酸化及脂质修饰等翻译后加工。然而，其 N-糖基化路径相对简化，多数糖链停留在少甘露糖型或简单杂合型阶段，缺乏复杂末端唾液酸结构。从结构生物学角度看，这种相对均一的糖型反而降低了构象异质性，有利于蛋白结晶与高分辨率结构解析。对于膜蛋白，昆虫细胞仍可提供关键的脂质修饰，如肉豆蔻酰化或棕榈酰化，以支持蛋白正确定位和构象稳定。五、多亚基蛋白复合物的原位组装优势BEVS 最具代表性的技术优势在于其强大的多基因共表达能力。许多关键生物分子以异源多聚体形式发挥功能，而昆虫细胞内源性的分子伴侣网络为复合物的同步折叠与组装提供了理想环境。通过多病毒共感染或多基因 Bacmid 构建策略，不同亚基可在同一细胞内以受控比例表达，并在翻译过程中完成原位组装。这种细胞内组装机制避免了体外复性过程中常见的效率损失，是获取完整功能性复合物的重要技术路径。六、 总结 总体而言，杆状病毒-昆虫细胞表达系统通过将病毒极晚期转录机器与真核细胞的折叠和修饰体系相结合，形成了一套高度协同的表达平台。深入理解其病毒学基础、载体构建逻辑及宿主代谢特性，是合理利用该系统开展复杂蛋白与复合物研究的关键。

近日， 山东大学卢绪坤副研究员 、 清华大学颉伟教授 和 复旦大学张宇青年研究员 团队合作，通过全基因组DNA甲基化测序（WGBS）、染色质免疫共沉淀测序（ChIP-seq）和转录组测序（Smart-seq）等分析 系统揭示了组蛋白修饰H3K36me2在小鼠早期胚胎发育过程中的动态重编程规律及其对胚胎植入后谱系特异性de novo DNA甲基化中的关键调控作用 。相关研究成果以“ Reprogramming of H3K36me2 guides lineage-specific post-implantation de novo DNA methylation ”为题发表于《Nature Cell Biology 》期刊。研究通过STAR ChIP-seq和WGBS等高通量测序技术，绘制了从卵母细胞到植入后胚胎的H3K36me2全基因组图谱，并发现H3K36me2在合子基因组（ZGA）激活后分两步重建（de novo）：首先在ZGA后定位于增强子区域，随后在植入后扩散至全基因组（除失活X染色体外）。有趣的是，这种重编程通过差异性调控DNMT3A和DNMT3B两种DNA甲基转移酶，实现对胚胎谱系（高甲基化）和胚外谱系（部分甲基化）以及特定位点（生殖系基因启动子）DNA甲基化建立的精准调控。 本研究结果为理解哺乳动物表观遗传重编程机制提供了重要理论依据。 英文标题： Reprogramming of H3K36me2 guides lineage-specific post-implantation de novo DNA methylation中文标题： H3K36me2重编程调控谱系特异性植入后的de novo DNA甲基化发表时间： 2025年11月11日发表期刊： Nature Cell Biology 影响因子： IF19.1/Q1技术平台： ChIP-seq、WGBS、Smart-seq2作者单位： 山东大学、清华大学、复旦大学DOI:10.1038/s41556-025-01805-8广泛所知，哺乳动物在受精后会经历全局DNA去甲基化，随后在胚胎植入后重建，但其背后分子机制尚未完全阐明。 本研究探究了小鼠早期发育过程中H3K36me2重编程规律及其在植入后DNA甲基化重建中的作用。 研究发现，在卵母细胞中，H3K36me2伴随转录沉默主要在基因体区域积累，并部分维持至8细胞期；当合子基因组激活后，H3K36me2在增强子区域重建，随后在植入后扩散至全基因组。此外， H3K36me2甲基转移酶NSD1突变会损害植入后的全局DNA甲基化，尤其在胚外谱系以及易甲基化的启动子区域表现显著 。同时，DNA甲基化建立可通过DNMT3B上调且存在部分不依赖于H3K36me2，即没有H3K36me2/3仍能发挥一定作用；与之相对的，DNMT3A通过PWWP结构域并严格依赖H3K36me2/3才能进行DNA甲基化。最后，研究还发现DNA甲基化谷（DMVs）通过PRC1/H2AK119ub1介导的H3K36me2排斥机制避免了de novo DNA甲基化。因此，H3K36me2重编程调控了谱系特异性和位点特异性的植入后DNA甲基化建立。易小结本研究系统阐明了H3K36me2连接组蛋白修饰与DNA甲基化两种关键表观遗传标记的分子机制，填补了植入后DNA甲基化重建调控机制的研究空白，对生殖医学、发育生物学及表观遗传疾病机理研究具有重要指导价值。技术上，本研究充分发挥WGBS和ChIP-seq协同优势，构建从染色质状态到DNA甲基化的完整调控机制，为解析动态、微量样本的表观遗传多组学整合策略在揭示复杂生物学过程中的重要作用，为未来探索其他发育或疾病模型中的表观调控机制提供可借鉴的研究思路。研究方法（1）小鼠模型和样本处理：利用C57BL/6N和PWK/PhJ品系小鼠，收集从卵母细胞到胚胎第8.5天（E8.5）的各个发育阶段样本；分离囊胚的内细胞团（ICM）和滋养层（TE），并获得植入后胚胎的胚胎外胚层（Epi）和胚外外胚层（ExE）谱系组织；构建催化结构域关键位点缺失的Nsd1基因敲除（KO）小鼠。（2）关键分子机制探索：STAR ChIP-seq ： 对微量样本（如卵母细胞、早期胚胎）进行H3K36me2、H3K36me3、H3K27ac、H3K27me3、H2AK119ub1等组蛋白修饰的全基因组定位分析。全基因组甲基化测序（WGBS）： 对胚胎和组织样本进行全基因组DNA甲基化检测，以评估不同发育阶段和基因型下的甲基化动态。微量RNA-seq（Smart-seq2）： 分析基因表达变化，并与表观修饰数据关联。（3）体外实验：利用小鼠胚胎干细胞（mESCs），通过基因编辑（CRISPR-Cas9）构建Nsd1敲除、PRC1核心组分（RING1A/B）缺失、以及DNMT3A/3B/TET等多基因敲除的细胞系。在体外模拟从“初始态”到“形成态”多能性转变（2i到EpiLCs），研究DNA甲基化建立过程。（4）药理学干预：使用转录抑制剂（α-amanitin, DRB）、细胞周期抑制剂（aphidicolin）、组蛋白乙酰化抑制剂（A-485）等处理胚胎，探究转录、细胞周期、组蛋白修饰对H3K36me2重编程的作用。（5）分子生物学与生化实验：免疫荧光染色、蛋白质免疫印迹（Western Blot）、过表达DNMT3A/3B及其PWWP结构域缺失突变体等，验证蛋白表达、定位及功能。关键结果（1）H3K36me2在小鼠早期发育过程中动态重编程及卵母细胞中转录依赖性的H3K36me2/3动态变化研究团队首先通过免疫染色和STAR ChIP-seq技术（图1a）绘制了从卵母细胞到植入后胚胎的H3K36me2全基因组分布图谱。 研究结果发现，H3K36me2动态变化与H3K36me3（始终位于活跃基因体）存在显著差异 。在卵母细胞和植入前胚胎中，H3K36me2主要存在于基因体区域（图1a蓝色阴影），而在ZGA后， H3K36me2开始出现在增强子区域（图1a红色阴影及黑色箭头），并在植入后扩展至全基因组的基因间区域（图1a绿色阴影），类似于小鼠胚胎干细胞（mESCs）和体细胞中的模式。在卵母细胞成熟过程中，H3K36me2和H3K36me3的分布与转录状态密切相关。 在转录活跃的非包绕核仁(non-surrounded nucleolus,NSN)的成熟卵母细胞（full-grown oocyte,FGO)中，H3K36me3高度富集于活跃基因体，而H3K36me2水平较低（图1b-c）。随着卵母细胞成熟至转录沉默的包绕核仁（SN）FGO和MII期，基因体上的H3K36me2增加，H3K36me3减少（图1b-c）。使用转录抑制剂DRB处理NSN卵母细胞，可以介导活跃基因体上H3K36me2增加和H3K36me3减少（图1d-e），证实了这种动态的转录依赖性。上述发现解释了卵母细胞特异性DNA甲基化模式的建立机制，即 H3K36me3主导转录活跃区域的DNA甲基化，而H3K36me2可能在其他区域发挥作用 。图1：小鼠卵母细胞及早期胚胎中H3K36me2的定位图谱 （2）父源H3K36me2在早期合子中缺失，而母源H3K36me2在植入前发育中缓慢减少，ZGA后转录关联的H3K36me2重编程 通过等位基因特异性ChIP-seq分析，研究精确追踪了双亲本H3K36me2命运（图2）。结果显示，父源H3K36me2在受精后的早期合子中几乎完全缺失（与免疫染色结果一致），随后逐渐重建。而母源H3K36me2在1-8细胞期胚胎中被短暂继承，其模式与MII期卵母细胞相似，之后逐渐减弱。因此，在囊胚ICM之前，全基因组范围的H3K36me2呈现母源偏向。这种双亲本差异导致早期胚胎中H3K36me2存在显著的母源偏倚，直至ICM阶段才实现等位基因平衡。 对于卵母细胞特异性基因，母源H3K36me2可维持至8细胞阶段，而H3K36me3在MII期即已丢失，提示两种修饰具有不同的染色质继承稳定性 。 这一发现揭示了早期胚胎中表观遗传信息的不对称传递模式。 ZGA标志着胚胎从母源调控向合子调控转换，研究深入分析了此阶段H3K36me2的重编程机制。在主要ZGA基因和持家基因（HK）中，ZGA后基因体区域出现H3K36me2相对缺失，而侧翼区域出现H3K36me2重建（图2b-c）。使用α-amanitin抑制转录可阻止2细胞期和8细胞期胚胎中ZGA基因和持家基因区域H3K36me2的这种重编程（图2d-e）。 表明ZGA后基因体上的H3K36me2重编程依赖于合子转录。 图2：H3K36me2在小鼠早期发育过程中发生动态重编程。 （3）H3K36me2在ZGA后于推定的增强子区域重建，H3K36me2在失活X染色体上缺失，并在X染色体再激活后于增强子区域重现 研究发现了H3K36me2重编程的关键特征。 分析发现，ZGA后H3K36me2与增强子标记H3K27ac的共定位显著增强，相关性从1细胞期的R=0.28升至8细胞期的R=0.79 （图3a-b）。 远端H3K27ac峰在8细胞期被H3K36me2优先标记（图3a底部）。使用A-485抑制P300/CBP介导的组蛋白乙酰化后，特异性地损害了8细胞期胚胎中H3K27ac富集区域的H3K36me2重建（图3c-d）， 表明组蛋白乙酰化部分介导H3K36me2向增强子招募。 但H3K36me2在植入前并未扩散至全基因组，其限制因子尚不完全清楚，可能存在其他调控机制。在经历印记X染色体失活（XCI）的胚外谱系中，失活的父源X染色体（Xp）在植入前发育全阶段始终维持极低的H3K36me2水平（图3e）。在体外来源的胚外内胚层（XEN）细胞中，沉默Xist导致失活X染色体部分再激活，伴随H3K36me2在Xp上显著增加，且与H3K27ac获得和H2AK119ub1/H3K27me3减少密切相关（图3f）。再激活后出现的H3K36me2峰靠近去抑制基因，提示其与增强子活性和基因激活相关。 这一发现表明XCI状态通过PRC1介导的H2AK119ub1和PRC2介导的H3K27me3排斥H3K36me2，维持Xi的表观遗传沉默。 图3：H3K36me2在增强子区域重建可能由组蛋白乙酰化介导。（4）H3K36me2与胚外谱系中DNA甲基化建立相关性更强研究利用已发表的野生型及Dnmt3a和Dnmt3b敲除胚胎数据，分析了H3K36me2/3与植入后DNA甲基化建立的相关性。在胚胎谱系(Epi)中中，野生型胚胎从ICM到E6.5的DNA甲基化增益与H3K36me3相关性较弱（R=0.08），与H3K36me2相关性中等（R=0.33）。Dnmt3b敲除后，DNMT3A依赖的DNA甲基化与H3K36me2/3的相关性显著增强（H3K36me2: R=0.50；H3K36me3: R=0.38），而Dnmt3a敲除后DNMT3B依赖的DNA甲基化与H3K36me2/3相关性仍较低（图4c-d）。相比之下，在胚外谱系（ExE）中，无论是野生型还是仅存在一种DNMT的情况下，DNA甲基化增益与H3K36me2/3相关性都更强（图4c,f-g）。进一步分析显示，DNMT3A和DNMT3B主要甲基化H3K36me2/3标记区域，而H3K36me2/3低的区域则更多地依赖于DNMT3B（图4e）。这表明胚外谱系更依赖H3K36me2/3指导的DNA甲基化建立，可能与该谱系中Dnmt3a/3b表达水平较低有关。图4：与胚胎谱系相比，H3K36me2在胚外谱系中与DNA甲基化（DNAme）建立的相关性更强。（5）H3K36me2调控体内植入后DNA甲基化建立，H3K36me2促进包括生殖系基因在内的启动子区域甲基化通过建立Nsd1催化失活突变小鼠模型，研究直接验证了H3K36me2在体内的功能。Nsd1敲除导致胚胎从E6.5起出现严重生长迟缓，E8.5前致死（图5a-b）。H3K36me2在E6.5胚胎中整体丢失，主要影响非转录区域（图5c）。 WGBS分析显示，突变体胚胎中H3K36me2富集区域的DNA甲基化在胚胎谱系中中度下降，但在胚外谱系中缺失显著 （图5c-d）。而H3K36me3富集区域的DNA甲基化几乎不受影响，提示DNMT3A/3B在H3K36me2缺失时被重定向至H3K36me3标记区域。DNA甲基化缺失趋势从E6.5到E8.5在胚胎谱系中逐渐减小，但在胚外谱系中加剧（图5d），与两种谱系中Dnmt3b表达差异相一致。 上述研究结果表明在胚外谱系中，H3K36me2对植入后DNA甲基化建立至关重要。 研究者关注了一类对DNA甲基化敏感的生殖系基因（DMS germline genes）。 WGBS分析显示，在E6.5胚胎谱系中，Nsd1敲除导致这些基因的CpG岛和非CpG岛启动子甲基化降低，在胚外谱系中也观察到类似的启动子低甲基化和部分基因去抑制 （图5e）。 RNA-seq(Smart-seq2)分析发现Nsd1敲除的E6.5 Epi中有1158个基因上调、737个下调，上调基因显著富集于减数分裂细胞周期和piRNA代谢通路 ，包括Piwil2、Ddx4、Asz1、Sohlh2、Sycp1等生殖系特异性基因；其中67个（48.9%）DMS生殖系基因上调表达，如Sohlh2和Tex19.1（图5f-g）。这种启动子低甲基化和基因去抑制状态持续至E8.5。值得注意的是，在野生型胚胎中，DMS生殖系基因启动子上的H3K36me2水平高于所有启动子的平均水平。 表明H3K36me2促进了植入后胚胎中启动子（包括生殖系基因启动子）甲基化维持生殖系基因的沉默状态，防止其过早表达。 图5：H3K36me2在体内调控植入后DNA甲基化（DNAme）建立。（6）H3K36me2调控体外“初始态”向“形成态”多能性转变过程中的高效de novo DNA甲基化研究利用2i mES细胞向EpiLCs分化的体外模型模拟“初始态”（naive）向“形成态”（formative）转变（2i mESCs向EpiLCs分化）。结果显示，Nsd1敲除在2i mES细胞中导致H3K36me2几乎完全缺失，剩余信号仅存在于H3K36me3富集的活跃基因体（推测为SETD2活性所致）。WGBS 显示，Nsd1敲除2i mES细胞中DNA甲基化水平极低，但主动基因体出现DNA甲基化增加（可能由于DNMT3A重定向）；而在EpiLC分化过程中，Nsd1敲除细胞的DNA甲基化积累显著延迟，尤其在H3K36me2富集区域 （图6b-d）。相比之下，从E3.5 ICM到E6.5 Epi的体内发育中，Nsd1敲除的DNA甲基化缺失相对较轻（图6e-f），可能与体内Dnmt3a/3b表达水平更高有关（图6g）。图6：H3K36me2在体外调控 de novo DNA甲基化。结论和启示本研究系统揭示了H3K36me2在哺乳动物早期胚胎发育中作为关键表观遗传标记信号及其动态重编程规律，具体而言，H3K36me2通过差异性介导DNMT3A和DNMT3B实现对植入后谱系和位点特异性DNA甲基化重建的精准调控。该发现不仅深化了对生命起源初期表观基因组正确编程机制的理解，揭示了DNMT3A与DNMT3B在机制上的根本性差异，也为探索发育异常、疾病中表观调控动态变化提供了新的研究思路。研究所展示的多时间点、微量样本多组学整合分析策略，为未来研究其他动态生物学过程中的表观遗传机制提供方法学参考。ChIP-seq 和WGBS在本研究中的核心作用 ChIP-seq ： 克服早期胚胎样本量极少的挑战，实现了对H3K36me2、H3K36me3、H3K27ac等多种组蛋白修饰在多个精细发育时间点的全基因组动态监测，从而绘制出前所未有的H3K36me2重编程全景图谱。WGBS ： 提供DNA甲基化水平的单碱基分辨率检测，将H3K36me2动态变化与DNA甲基化建立直接关联，并在Nsd1敲除、PRC1缺失等遗传模型中定量评估甲基化缺失程度与区域特异性。ChIP-seq 和WGBS两种技术的整合应用， 从“因”（组蛋白修饰）和“果”（DNA甲基化）上严谨地验证了H3K36me2的调控功能，并精细解析了其对不同谱系、不同位点的特异性影响，是本研究取得突破性发现的关键技术保障。参考文献：Lu X, Wang L, Liu B, Hu X, Wang Z, Liu L, Yu G, Dong L, Kong F, Fan Q, Zhang Y, Xie W. Reprogramming of H3K36me2 guides lineage-specific post-implantation de novo DNA methylation. Nat Cell Biol. 2025 Nov 11. doi: 10.1038/s41556-025-01805-8.

春节假期刚过，哈尔滨东北虎林园的300多只东北虎迎来了“轻断食”计划。由于节日期间游客激增，投喂量远超平日，不少老虎出现“吃撑”现象，园方决定在2月1日至3月31日期间，每天让一个园区暂停游客投喂，以帮助老虎调理肠胃。据统计，今年春节假期哈尔滨文旅接待游客人次同比增长12.4%，旅游总花费同比增长10.6%。东北虎林园日均接待游客量超过一万人次，其中不少人专程为投喂“百兽之王”而来。面对递到嘴边的肉块，一些老虎直接扭头避开，甚至对活鸡也仅是戏耍而不吞食。园方工作人员解释，这是为了防止老虎过度肥胖，影响健康。游客投喂的热情高涨，但老虎的“食欲”却明显下降。有网友分享，自己用钳子夹着肉条在老虎面前晃动，甚至喊出“咪咪”试图吸引注意，但老虎却爱答不理。这种现象引发网友调侃：“东北虎也就是吃饱了，懒得跟人类计较。”实际上，老虎的“厌食”并非毫无原因。根据游客介绍，投喂采取“先用后付”模式，每人上车后分得一小桶肉条，每块20元，喂多少付多少。部分游客为增加互动，会刻意逗弄老虎，但在春节期间，即使肉条杵到嘴边，老虎也懒洋洋的不愿动弹。园方表示，轻断食期间，游客仍可体验投喂，只是每天有一个园区禁喂，其他园区正常开放。过度投喂不仅让老虎“吃撑”，还可能引发健康问题。有游客拍到老虎呕吐，吐出的肉一大滩；还有老虎对游客产生回避心理，不敢转头生怕被再次投喂。国家林草局猫科动物研究中心主任张明海指出，人工饲养的老虎活动范围小、运动量低，加上游客投喂量难以控制，容易导致肥胖和行为懒散。他强调，“轻断食”是长期调控食物量的策略，需科学实施。类似情况并非个例。云南野生动物园的小浣熊春节后平均胖了3斤，水豚体重飙升5斤；上海野生动物园的老虎、狮子等猛兽每周也有一天“健康管理日”，仅饮水不食肉，模拟野外生存环境。无锡动物园则通过调整饲料配方，增加纤维素含量高的芦苇叶促进水豚消化，或让羊驼细嚼仙人掌提升饱腹感。动物园的“减肥计划”不仅限于饮食控制，还通过激发动物天性增加运动量。武汉动物园的小熊猫因超重被要求减肥，饲养员端着碗绕木架移动，逗引它们上蹿下跳；成都动物园曾给猛兽准备“便便汤圆”，用猎物气味刺激野性；济南趵突泉的锦鲤则因游客投喂面包、饼干等高糖食物肥胖，去年北大团队引入智能仿生鱼，吸引鱼群跟随运动。然而，过度投喂的负面影响不容忽视。灵长类动物因频繁被投喂可能出现行为异化，如生气、吼叫、乞食等；一些动物甚至会误食包装袋、干燥剂等异物，危及生命。西宁野生动物园雪豹繁育基地通过树桩取食器增加雪豹攀爬、抓取等自然行为，减少呆坐、乞食等刻板行为，为行业提供了参考。面对游客投喂需求与动物健康的矛盾，部分动物园开始探索转型。南京红山动物园和西宁野生动物园已完全取缔商业投喂，通过丰容改善动物生存环境，客流不降反升。西宁野生动物园原副园长齐新章认为，有趣的讲解和动物个体故事科普能减少投喂欲望，教育引导游客是动物园的职责之一。并非所有超重或懒散情况都需干预。攀枝花动物园一只十六七岁的金钱豹因年龄较大，园方与专家讨论后决定“健康快乐就好，减肥随缘”。这一做法引发网友共鸣：“豹豹不减了，那我也不减了。”

据海外媒体报道，特斯拉在澳大利亚电动汽车市场的表现经历了一月低迷后，于二月迎来显著反弹。数据显示，Model Y车型当月销量环比激增，以2791辆的成绩重新夺回市场销量冠军宝座，其销量是第二名车型的两倍以上。此前受Model Y单月仅售288辆影响，特斯拉1月在澳大利亚的电动汽车总销量骤降至501辆，虽仍保持市场第二位置，但与比亚迪2779辆的销量差距悬殊。这种局面在二月得到彻底扭转——除Model Y销量暴涨外，Model 3车型也实现环比翻番，从1月的213辆增至483辆。两款主力车型的强势表现带动特斯拉整体销量攀升至3274辆，不仅重返市场榜首，更与第二名厂商拉开显著差距。行业分析指出，特斯拉通过及时调整销售策略，有效缓解了年初的市场压力，其产品竞争力在澳大利亚市场仍具优势。

在近期举办的“鸿蒙智行技术焕新发布会”上，华为正式推出了全球首款双光路图像级896线激光雷达。这款产品凭借其首创的双光路架构，将分辨率提升至行业最高水平，较传统产品最高提升4倍，成为全球量产规格最高的激光雷达。其核心优势在于能够稳定识别120米外高度仅14厘米的物体，包括横倒锥筒、破损轮胎等低反射率目标，为智能驾驶提供了更可靠的环境感知能力。华为智能汽车解决方案BU CEO靳玉志解释称，传统激光雷达因精度有限，成像呈现为点云状态，而新一代产品通过双光路专利技术，实现了从3D点云到3D成像的跨越。该技术采用一体双焦设计，集成广角与长焦两个激光接收单元：广角单元负责全局监测，长焦单元聚焦远距离细节，二者协同形成“高清画中画”效果。这种架构使其对底盘高度以上的小障碍物、低反射率物体及异形障碍物的识别能力显著增强。在100至200米的中远距离场景中，长焦单元可精准捕捉物体细节，同时保持对全局环境的感知。车厂可根据需求灵活选择广角或双焦模式，这种设计使新一代激光雷达的分辨率较前代提升4倍。具体性能方面，其可在120米外识别14厘米高的物体，这一高度与多数车辆底盘持平，可有效预防托底事故。靳玉志举例称，在55米距离处，系统甚至能清晰捕捉到小狗摇尾巴的动态细节。针对低反射率物体，该雷达的识别距离提升190%，例如高速路上的破损轮胎可在120米外被识别；对异形障碍物的识别距离则提升77%。这些突破得益于其896线的垂直扫描密度——每线对应一束独立激光，线数越多，垂直方向扫描越密集，3D成像越清晰。此前行业量产激光雷达最高线数为520线，华为此次将这一指标推至全球新高。据披露，鸿蒙智行旗下的问界M9与尊界S800将成为首批搭载该激光雷达的车型，售价分别从47.98万元和72.8万元起。鸿蒙智行“五界”体系及更多“华系”品牌车型计划陆续应用这一技术，推动高阶智能驾驶功能的普及。

在最新公布的安兔兔安卓旗舰手机性能榜单中，2026年2月的排名格局呈现出激烈竞争态势。iQOO 15 Ultra以4208894分的平均成绩登顶榜首，红魔11 Pro+则以4165081分紧随其后，两款机型通过差异化技术路线展现了旗舰性能的多元可能性。榜单特别强调，所有分数均基于当月用户实际跑分数据的平均值，而非厂商宣传的峰值数据，这种统计方式更能反映设备在日常使用中的真实表现。红魔11 Pro+的硬件配置堪称豪华，其搭载的高通第五代骁龙8处理器配合24GB LPDDR5T内存与1TB UFS 4.1 Pro存储，构建起强大的性能三角。该机型独创的散热系统尤为引人注目，通过镀金VC、金银风道与流金水冷技术的协同作用，配合"驭风 4.0"主动散热风扇，形成立体化散热网络。6.85英寸真全面屏采用屏下摄像头方案，1.5K分辨率与144Hz刷新率的组合，在视觉流畅度与功耗控制间取得平衡，95.3%的屏占比更带来沉浸式观感。排名第三的vivo X300 Pro卫星通信版与第四名realme GT8 Pro展开影像技术竞赛。后者首创的机械拼装设计允许用户自行更换后摄模组，通过简单的螺丝操作即可实现Deco部件的物理替换，这种模块化设计为手机影像系统带来前所未有的可玩性。其配备的2亿像素潜望长焦镜头支持120倍混合变焦，与联合理光开发的"负片"色彩风格形成独特影像语言。7000mAh硅碳负极电池与120W快充的组合，则解决了高功耗场景下的续航焦虑。榜单中段机型在性能与特色功能间寻求突破。荣耀Magic8 Pro凭借骁龙8 Elite Gen5处理器跻身第六，这款台积电3nm工艺打造的芯片采用全大核架构，GPU缓存升级至32MB，AI算力的大幅提升为端侧生成式AI应用提供算力支撑。其6.71英寸等深四微曲屏融合直屏的视野优势与曲屏的手感特性，展现出科技美学的创新表达。一加15与REDMI K90 Pro Max则分别以3839169分和3789514分占据第八、第十位，后者采用的6.9英寸超级像素屏通过独立子像素排列技术，实现超越传统2K屏的显示精度，为高端市场带来新的技术标杆。

水下检验—冀航警102/26 - 中华人民共和国海事局 English x 首页 机构职能 机构职责 领导介绍 内设机构 直属单位 政府信息公开 法定主动公开内容 政府信息公开指南 政府信息公开制度 政府信息公开年报 依申请公开 互联网+政务 我要办事 在线查询 航行安全 安全知识 事故教训 首页 航行安全 安全信息 航行警告 河北海事局 水下检验—冀航警102/26 来源：沧州海事局 文号：冀航警102/26 发布时间：2026-03-03 14:45 [字体：大中小] 分享到： 冀航警102/26，渤海，黄骅港，3月3日1500时至7日1900时在综合港区冀海码头对“北部湾梧州”轮进行水下检验。希各航船注意。 收藏打印本页关闭窗口 中央政府和国家部委 地方交通运输厅（局、委） 直属单位 主办单位：中华人民共和国海事局宣传处 | 网站声明 | 关于我们 | 联系我们 京ICP备09044872号-2 京公网安备11040102700062 网站标识码：BM19010001

水下检验—冀航警101/26 - 中华人民共和国海事局 English x 首页 机构职能 机构职责 领导介绍 内设机构 直属单位 政府信息公开 法定主动公开内容 政府信息公开指南 政府信息公开制度 政府信息公开年报 依申请公开 互联网+政务 我要办事 在线查询 航行安全 安全知识 事故教训 首页 航行安全 安全信息 航行警告 河北海事局 水下检验—冀航警101/26 来源：沧州海事局 文号：冀航警101/26 发布时间：2026-03-02 18:41 [字体：大中小] 分享到： 冀航警101/26，渤海，黄骅港，3月3日0800时至4日1900时在散货港区矿石码头1号泊位对“环球信任”轮进行水下检验。希各航船注意。 收藏打印本页关闭窗口 中央政府和国家部委 地方交通运输厅（局、委） 直属单位 主办单位：中华人民共和国海事局宣传处 | 网站声明 | 关于我们 | 联系我们 京ICP备09044872号-2 京公网安备11040102700062 网站标识码：BM19010001

从南海之滨到莱茵河畔，跨越山海，海南落地欧洲文旅核心市场。3月2日至4日，海南省旅游和文化广电体育厅在德国柏林举办“阳光海南·度假天堂”海南旅游文化推广交流活动，并组团参加2026年柏林国际旅游交易会（ITB Berlin）。代表团通过专场推介、展览展示、签约洽谈等系列活动，全面宣介海南自贸港政策优势和旅游资源，深化与德国及欧洲旅游业界的务实合作，取得丰硕成果。专场推介 全景展现海南旅游新魅力3月2日，“阳光海南·度假天堂”海南旅游文化推广交流活动在柏林举行。中国驻德国大使馆文化参赞李琦、海南省旅游和文化广电体育厅厅长陈铁军，以及Easy Booking（德语区主流酒店民宿预订管理系统）等德国旅游业界代表约40人出席活动。海南省旅游和文化广电体育厅厅长陈铁军在致辞中向德国朋友发出诚挚邀请。他表示，欢迎更多德国游客来琼旅游度假，亲身体验海南免签入境30天的便利政策，感受热带海岛独特魅力，共享海南自贸港建设带来的开放发展新机遇。陈铁军进行海南旅游推介“阳光海南·度假天堂”海南旅游文化推广交流活动在旅游推介环节，海南省旅游和文化广电体育厅面向欧洲市场发布“六大主题旅游线路”，通过播放《你好海南》《海南六大主题旅游线路》宣传片，集中展示了城市休闲与航天研学、阳光海岸与奢享度假等多元文旅体验，向欧洲市场发出盛情邀约。三亚市旅游发展局对三亚热带滨海旅游资源进行了专项推介，三亚凤凰国际机场重点介绍了机场航线网络及第五航权航线运营情况。期间，三亚市旅游发展局联合凤凰国际机场等企业与撒马尔罕航空、Easy Booking签署合作备忘录，两地将以航线开放新机遇深化亚欧旅游互联互通。三亚市旅游发展局进行专项推介签署合作备忘录亮相国际旅交会 多维度拓展合作新空间3月3日至5日，恰逢2026年柏林国际旅游交易会举办，海南省旅游和文化广电体育厅代表团出席中国展区开幕式，并设立海南主题展台。海南主题展台以“阳光海南 度假天堂”为主题，通过精心制作的宣传视频、折页画册以及独具匠心的文创产品，向世界递出了一张立体的“海南名片”，全面展示了海南自由贸易港背景下的文旅新形象。展会现场还推出“酷游海南”二维码互动活动，国际旅行商扫码即可获赠特色文创礼品，轻松获取海南旅游资讯及最新免签政策。通过这种形式，进一步提升了海南文旅品牌在欧洲市场的亲和力与传播效果。展会期间，代表团积极开展商务洽谈，密集拜会多家国际重点旅游企业与机构。在旅游同业方面，代表团拜访了德国旅行社和旅行经营者协会（DRV），围绕旅游市场开发展开专项探讨，结合欧洲游客喜好，共同打造“一程多站”入境游产品。在航空及航线合作领域，代表团向神鹰航空重点推介海南旅游资源，并与柏林勃兰登堡机场有限公司就航线开发、客源互送等合作方向深入交换意见。此外，三亚市旅游发展局分别与凤凰国际机场有限责任公司、斯卡特航空、里加机场、孤独星球签署合作备忘录。代表团拜访德国旅行社和旅行经营者协会（DRV）代表团拜访神鹰航空陈铁军拜访参展旅行商“原来海南不只有阳光和沙滩，这里还有这么丰富的热带雨林和康养资源！”一位来自德国的旅行商在详细了解展出的六大主题线路后表示，海南的免签政策和多元化的旅游产品为他打开了新窗口。展会现场，国际旅行商们对海南雨林探险、医疗康养等特色资源表现出浓厚兴趣，咨询洽谈络绎不绝。海南展台吸引旅行商驻足精心布置海南展台“酷游海南”二维码近年来，海南与德国旅游交流基础扎实，合作势头持续向好。据悉，2025年海南接待德国游客同比增长15.4%；2026年1月接待德国游客同比增长41.5%。2025年7月27日，神鹰航空执飞的“法兰克福=曼谷=三亚”第五航权国际客运航线开通，系海南自贸港首条直通欧洲的第五航权客运航线，为两地人员往来搭建了便捷空中通道。接下来，海南代表团将前往捷克布拉格，继续举办海南旅游文化推广交流活动，深入拓展中东欧客源市场，推动海南与中东欧国家在旅游、航空等领域的务实合作。

水下检验—冀航警100/26 - 中华人民共和国海事局 English x 首页 机构职能 机构职责 领导介绍 内设机构 直属单位 政府信息公开 法定主动公开内容 政府信息公开指南 政府信息公开制度 政府信息公开年报 依申请公开 互联网+政务 我要办事 在线查询 航行安全 安全知识 事故教训 首页 航行安全 安全信息 航行警告 河北海事局 水下检验—冀航警100/26 来源：曹妃甸海事局 文号：冀航警100/26 发布时间：2026-03-02 17:34 [字体：大中小] 分享到： 冀航警100/26，渤海，曹妃甸港，3月3日至4日，每日0800时至1800时，在实业码头1号泊位前沿50米范围内对“FLAGSHIP”轮进行水下检验。 现场悬挂潜水A字旗。 希各船舶注意。 收藏打印本页关闭窗口 中央政府和国家部委 地方交通运输厅（局、委） 直属单位 主办单位：中华人民共和国海事局宣传处 | 网站声明 | 关于我们 | 联系我们 京ICP备09044872号-2 京公网安备11040102700062 网站标识码：BM19010001